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CRISPR那些事儿
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FAQ
是否可以与常规的抗生素和青霉素、链霉素、两性霉素、庆大霉素等混合使用
由于该试剂本身已具备常规抗生素的功能,且为了减少细胞生存压力,我们不建议在使用该试剂期间再使用其他的抗生素。
检测清除细胞仍存在支原体感染
顺利获得处理的细胞,绝大多数支原体应被清除殆尽,如遇减少但未被清除完全,可将工作浓度增加50 %再处理1个周期。
支原体清除导致细胞死亡或状态差
对于大部分细胞,经测试支原体清除无细胞状态上的影响,但对于存在的敏感细胞,建议清除支原体前备份细胞,在清除支原体时细胞死亡或状态差时,将工作浓度减半,周期增加一轮,即28 days。
是否可以与常规的抗生素和青霉素、链霉素、两性霉素、庆大霉素等混合使用
由于该试剂本身已具备常规抗生素的功能,且为了减少细胞生存压力,我们不建议在使用该试剂期间再使用其他的抗生素。
检测清除细胞仍存在支原体感染
顺利获得处理的细胞,绝大多数支原体应被清除殆尽,如遇减少但未被清除完全,可将工作浓度增加50 %再处理1个周期。
支原体清除导致细胞死亡或状态差
对于大部分细胞,经测试支原体清除无细胞状态上的影响,但对于存在的敏感细胞,建议清除支原体前备份细胞,在清除支原体时细胞死亡或状态差时,将工作浓度减半,周期增加一轮,即28 days。
是否可用于试剂的支原体检测
对于常用的细胞培养试剂,如培养基、血清等,本试剂盒可检测支原体,检测时无需进行样本制备,直接进行PCR反应后点样即可;对于DMSO、乙醇等有机溶剂,本试剂盒无法检测。
阴性对照出现条带
更换新启用的阴性标品进行复核,注意点样时更换枪头、点样优先阴性及阴性标品存放,避免样品间的交叉污染
样本反复检测结果不符
PCR法检测支原体较为灵敏,应注意样本间的交叉污染,取样时,在无菌条件下单独取样每个样品,进行样本处理、PCR反应后,待样本冷却再进行下一步操作,避免气溶胶污染样。
KO细胞系与基因敲除动物模型有什么区别?
KO细胞系和基因敲除动物模型都用于研究基因功能,但它们各自有不同的应用场景和优势。KO细胞系在体外实验中使用,适用于高通量筛选和细胞水平的基因功能研究。基因敲除动物模型则在体内实验中使用,适用于研究基因在整个生物体中的功能及其与其他基因和环境的相互作用。
KO细胞系是否适用于所有类型的细胞?
KO细胞系可以在多种类型的细胞中应用,包括癌细胞、干细胞、原代细胞等。然而,不同类型的细胞对基因编辑的敏感性和效率可能有所不同。在某些细胞类型中,基因敲除可能更具挑战性,需要优化转染条件和选择合适的基因编辑工具。
什么是Prime Editing?
Prime Editing是一种新型基因编辑技术,能够在不引入双链DNA断裂的情况下实现精确的基因编辑。它拥有两个核心的组分,分别是pegRNA与PEmax基因编辑酶(Cas9n-RT)。pegRNA不仅能够定位目标序列,还包含要修改的碱基信息。pegRNA与PEmax基因编辑酶(Cas9n-RT)结合后组成编辑系统后,pegRNA引导PEmax到指定的编辑位点上,切断DNA的单链,并逆转录出pegRNA中的待修改序列,然后将该序列插入到目标基因组位置中,从而实现精准的单碱基替换或小范围的插入和删除。
Prime Editing 7(PE7)与传统的CRISPR/Cas9技术有何不同?
传统的CRISPR/Cas9技术主要顺利获得在目标DNA上引入双链断裂,再利用细胞同源重组修复机制来实现基因编辑。这种策略有较多风险,如编辑效率和纯合概率低,容易导致随机的插入或缺失突变等。Prime Editing则不需要DNA双链断裂。Prime Editing具有Cas9n-RT编辑酶系统与pegRNA两个关键组分,可实现更为精确和安全的基因编辑,减少了脱靶效应。
为什么选择球盟会生物基因点突变服务?
球盟会生物基因全新升级第七代Bingo™ Prime Editing (PE7),优化编辑蛋白和RNA编辑活性。对比第五代PE技术,点突变成功率和基因编辑效率显著提升,全球知名院校博士专家团队一对一服务。
球盟会生物基因的Bingo™ Prime Editing 7(PE7)平台如何保证点突变的成功率?
球盟会生物基因的Bingo™ Prime Editing 7(PE7)平台基于超过十年的基因编辑经验,结合成千上万个基因编辑CRO项目的总结、优化和提升,具有远超传统基因位点特异性突变系统的成功率。Bingo™ Prime平台采用高效的逆转录酶和精准的先导RNA设计,确保每一次点突变都能达到预期效果。