干扰稳转细胞株
干扰稳转细胞株现货
服务详情
细胞类型 | 各种细胞类型,包括肿瘤、常规、干细胞、原代和永生化细胞系。 |
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服务类型 | shRNA干扰细胞株/CRISPRi细胞株 |
交付标准 | 1)基因干扰多克隆细胞pool(2管细胞/株,1×10^6/管) 2)基因干扰单克隆细胞≥1株(2管细胞/株,1×10^6/管) 3)实验报告 |
周期/价格 |
快至6周 |
服务优势
多种骨架载体选择
高效的单克隆分选技术
高效的细胞转染
团队经验丰富
服务类型
shRNA干扰细胞株
shRNA(短发夹RNA)干扰稳转细胞株是顺利获得将设计好的shRNA序列稳定整合到宿主细胞基因组中,实现长期、稳定基因沉默的细胞模型。shRNA在细胞内表达后,会被Dicer酶加工成siRNA(小干扰RNA),随后siRNA与RISC(RNA诱导沉默复合体)结合,引导复合体识别并切割互补的mRNA分子,最终导致目标基因的表达沉默。 联系我们
服务流程
CRISPRi细胞株
CRISPRi(CRISPR interference)是一种基于CRISPR系统的基因调控技术,它利用经过改造的dCas9蛋白(失活的Cas9)与单导向RNA(sgRNA)结合,靶向并结合到目标基因的转录起始位点附近,形成空间位阻,阻遏基因转录从而实现基因表达抑制。哺乳动物细胞也可将dCas9融合转录抑制因子(如KRAB等)进一步抑制基因的表达)。顺利获得设计特定的sgRNA,CRISPRi可同时靶向多个基因位点,实现复杂基因网络的协同调控,为功能基因组学研究提供了强大工具。 联系我们
服务流程

成功案例
案例1:慢病毒介导的shRNA敲低CHRNA5基因表达
策略: 针对CHRNA5基因设计并合成1条特异性短发夹RNA(shRNA)序列。将该shRNA序列克隆至慢病毒载体EDV3021-pLV3-U6-MCS-CopGFP-Puro的U6启动子下游,构建shRNA表达载体。包装生产高滴度慢病毒颗粒后,感染目标细胞系。经Puromycin抗性筛选取得稳定整合shRNA表达框的细胞株。顺利获得定量实时荧光聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测感染后细胞中CHRNA5基因的mRNA表达水平变化。检测结果证实了该shRNA能有效下调CHRNA5基因的表达(结果展示见下图/表)。
图1:EDV3021-pLV3-U6-MCS-CopGFP-Puro载体骨架图谱
图2:CHRNA5基因qRT-PCR验证结果
案例2:基于CRISPRi系统的RPL4基因转录抑制
Advantage and Characteristic

Optimazied Strategy

Optimazied Strategy

Optimazied Strategy

Optimazied Strategy
FAQ
siRNA、shRNA和CRISPR干扰(CRISPRi)有什么区别?我该如何选择?
参数 | siRNA | shRNA(病毒载体) | CRISPRi |
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作用周期 | 瞬时(5-7天) | 长期(可稳定传代) | 长期稳定 |
细胞适用性 | 易转染细胞 | 广谱(包括难转染细胞) | 需要构建dCas9细胞系 |
脱靶风险 | 中-高 | 中 | 极低 |
用途 | 快速验证 | 动物/细胞模型 | 高精度调控 |
什么是基因干扰?它如何工作?
我们主要提供哪些类型的基因干扰技术服务?(例如:siRNA转染、shRNA慢病毒/腺病毒、CRISPRi)
技术类型 | 适用场景 | 交付形式 |
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siRNA转染 | 快速验证(72-96小时效果) | 快速验证(干扰后细胞/实验报告) |
shRNA病毒载体 | 长期抑制(稳定株筛选) | 病毒颗粒/稳转株细胞 |
CRISPRi | 高特异性、抑制(i)基因 | dCas9细胞系+gRNA载体 |